標(biāo)準(zhǔn)菌種的驗(yàn)收和污染的處理方法
實(shí)驗(yàn)室收到標(biāo)準(zhǔn)菌種,首先應(yīng)進(jìn)行符合性感官檢查,記錄菌株號(hào)和標(biāo)準(zhǔn)菌種來(lái)源途徑信息,確保溯源性清楚。同時(shí)還應(yīng)記錄標(biāo)準(zhǔn)菌種名稱和數(shù)量、生產(chǎn)日期、接收日期和有無(wú)破損等情況。
標(biāo)準(zhǔn)菌種確認(rèn)方法及依據(jù):
用無(wú)菌接種環(huán)取上述培養(yǎng)物,在相應(yīng)的培養(yǎng)基平板(營(yíng)養(yǎng)瓊脂、大豆胰蛋白胨瓊脂)上或相應(yīng)的細(xì)菌鑒別平板(如伊紅美藍(lán)、麥康凱、BP等上劃線分離單個(gè)菌落,置適宜條件下培養(yǎng)(若該類微生物為厭氧菌,則培養(yǎng)條件應(yīng)為厭氧條件)以同樣方法取真菌和酵母菌至SDA(薩布羅培養(yǎng)基)平板上或玫瑰紅鈉培養(yǎng)基平板上,23~28℃下培養(yǎng)7d;培養(yǎng)后觀察是否具有典型的菌落狀態(tài),然后挑取單一純菌落,進(jìn)行革蘭染色、鏡檢,觀察其染色特征及菌體形態(tài)以確定菌種。
標(biāo)準(zhǔn)菌種的污染處理方法:
假如在該平板上發(fā)現(xiàn)有其他菌落生長(zhǎng),則說(shuō)明操作有污染或菌種不純。要將該污染培養(yǎng)物做滅菌處理,尋找原因,重新分離挑選純菌落。
標(biāo)準(zhǔn)菌種的保存方式:
所有菌種均由實(shí)驗(yàn)室專人(雙人雙鎖)保存于冰箱或其它保存方式。要建立菌種登記臺(tái)帳,詳細(xì)記錄菌種采集、保管、制備、使用、處置情況;每一種菌種一定要有檢測(cè)鑒定報(bào)告(具體的的鑒定方法見ATCC提供的菌種證書方法);具體菌種保存方法一般為:
將復(fù)蘇后肉湯與滅菌甘油按15%甘油比例(肉湯8.5mL+甘油1.5mL)混合,-30℃凍存,(可用2mL凍存管凍存多管),作為保藏儲(chǔ)備菌株F1代,也可使用商品化的菌種保存管。
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